【细胞介绍】HepG2细胞系是一种典型的上皮样细胞，来源于一名15岁阿根廷白人男性肝癌患者的肝细胞癌。这种细胞能够分泌多种重要的血浆蛋白，包括白蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原及铁传递蛋白等。该细胞系由Wistar研究所提供，并被广泛用作转染宿主。其表达标志物包括胰岛素和胰岛素样生长因子II（IGFII）。HepG2细胞通常以紧密连接的方式生长，初期在培养瓶底部形成小岛状结构，后期可能表现为多层堆积或悬浮状态，因其良好的贴壁性，HepG2常用于肝细胞功能及病毒模型的研究。

【传代培养】该细胞系为贴壁生长。若细胞有脱落现象，应将培养液转移至无菌离心管中进行离心（125g，3-5分钟），收集悬浮细胞。轻轻去除培养基后，使用PBS洗涤贴壁细胞，随后添加1ml胰酶（0.25%含EDTA）使其消化。在显微镜下观察细胞变化，待细胞圆形化后轻拍瓶底，当约70-80%的细胞漂浮脱落时，立即加入5ml完全培养基中和。然后，再次离心收集细胞，调节细胞密度至每毫升0.6-2×10^5，将其转移至培养瓶中，并在培养箱中放置。

【细胞冻存】细胞密度达到80%且活细胞率在95%以上时，可以按照上述步骤收集细胞沉淀并进行冻存。使用适量的4°C冻存液重悬细胞，建议将T25瓶的细胞冻存为1ml/管，直接放置于-80℃超低温冰箱中过夜，若需要长期保存，需在-80℃下静置至少一天后再转至液氮罐中。

【细胞复苏】从液氮中取出的冻存细胞应立即转移至干冰中，准备好完全培养基等试剂与材料。冻管中的细胞应在37°C水浴中迅速解冻（约1-2分钟），消毒冻管外壁后，将内容物转移至含3-6ml完全培养基的离心管中，轻轻混匀并离心去除培养基。调整细胞密度至0.6-20×10^5，并转移至培养瓶，之后在培养箱中静置以促进生长。

【常见问题】1. 如果培养过程中出现细胞碎片，需注意这些碎片通常是细胞的外分泌泡或代谢产物。建议适当调整培养条件。2. HepG2细胞中常见的空泡并不会影响其生长，这是正常现象。3. 细胞生长缓慢时，可考虑增加血清浓度，但应确保不超过20%。4. 细胞聚团或不易贴壁通常由血清品牌和培养基pH值引起。5. 漂浮细胞现象在细胞传代或复苏后是正常的，随着时间推移会逐渐贴壁，不应随意丢弃。6. 圆形细胞附着在贴壁细胞上属正常情况，通常不需特别处理。

【注意事项】HepG2细胞对培养条件要求较高，尤其是pH值和血清质量，应使用高质量、低内毒素的胎牛血清，以促进细胞的贴壁与生长。此外，通过适当的传代与培养，HepG2细胞的上皮特性会逐渐显现。我们建议使用优质胎牛血清或选择订购我司的配套MEM完全培养液，以确保细胞的最佳生长环境。

【发表过的文献】截至2024年，以中乔新舟为作者的HepG2细胞相关文献已达72篇，整体影响因子为467.07，最高影响因子为2.75。下面列出一些代表性文献以供参考：

• 论文题目：Dienediamine: A safe surrogate for the herbicide paraquat，期刊：Molecular Plant，影响因子：2.75
• 论文题目：Photodegradation of carbon dots cause cytotoxicity，期刊：Nature Communications，影响因子：14.9193
• 论文题目：Ubiquitin-specific protease 1 facilitates hepatocellular carcinoma progression by modulating mitochondrial fission and metabolic reprogramming via cyclin-dependent kinase 5 stabilization，期刊：CELL DEATH AND DIFFERENTIATION，影响因子：13.74
• 论文题目：Site-specific ubiquitination of VDAC1 restricts its oligomerization and mitochondrial DNA release in liver fibrosis，期刊：EXPERIMENTAL AND MOLECULAR MEDICINE，影响因子：12.85
• 论文题目：Accumulation of nanoplastics in human cells as visualized and quantified by hyperspectral imaging with enhanced dark-field microscopy，期刊：ENVIRONMENT INTERNATIONAL，影响因子：11.8

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