俄罗斯专享会294的猪伪狂犬病毒gE蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒使用说明书

产品名称

通用名：猪伪狂犬病毒gE蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒

英文名：Blocking ELISA Kit For Detection Pseudorabies Virus gE Antibody

包装规格

可选择的规格有：96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒。

预期用途

伪狂犬病，又称为奥耶斯基氏病（Aujeszky's disease），是一种由伪狂犬病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起的急性传染病，主要影响家畜和多种野生动物，表现为发热、奇痒及呼吸与神经系统疾病。该病的免疫预防疫苗为gE基因缺失疫苗，而检测gE蛋白抗体可以作为野毒感染的重要指标。本试剂盒旨在检测猪血清中的抗伪狂犬病毒gE蛋白抗体，有助于区分临床上的野毒感染猪与使用gE基因缺失疫苗免疫的猪。

试剂盒组成

本试剂盒包含以下成分：

• 酶标记物：1ml×1（红盖）、2ml×1（红盖）、6ml×2（红盖）
• 样品稀释液：25ml×1（黄盖）、50ml×1（黄盖）、125ml×1（透明）
• 浓缩洗涤液：40ml×1（白盖）、40ml×1（白盖）、200ml×1（透明）
• 底物显色液：10ml×1（黑盖）、10ml×2（棕盖）、25ml×2（黑盖）
• 终止液：5ml×1（黄盖）、10ml×1（黄盖）、25ml×1（黄盖）
• 阳性对照：10ml×1（绿盖）、15ml×1（红盖）、20ml×1（红盖）
• 阴性对照：10ml×1（绿盖）、15ml×1（绿盖）、20ml×1（绿盖）
• 酶标板：96T×1、96T×2、96T×5，配有盖板膜和自封袋。

储存及有效期

本试剂盒应存放在2～8℃环境中，有效期为12个月。包被板开封后，请在2～8℃避光保存，并避免受潮，使用期限为2个月。

适用仪器

需要使用波长为630nm的酶标仪、37℃恒温设备以及可调微量移液器。

样品准备

1. 取各动物全血，离心处理4000r/min，10分钟后收集清亮血清；可选择让血液自然凝固后析出清 serum。

2. 用样品稀释液将血清按1:1比例稀释，无需稀释阴性和阳性对照。

3. 使用浓缩洗涤液前需恢复至室温，稀释为工作洗涤液，若出现结晶可加热溶解。

检验方法

1. 使用前将试剂盒放置室温30分钟，恢复至室温。

2. 从酶标板中取所需数量，设置阴性和阳性对照孔。

3. 分别在阴阳性对照孔中加入100μl对应的对照液，在样品孔中加入稀释后的样品100μl。

4. 混匀后盖好盖膜，在37℃避光反应1小时。

5. 清洗孔内液体，加入300μl工作洗涤液，重复洗涤5次，最后一次拍干。

6. 加入100μl酶标记物，盖膜，在37℃避光反应20分钟。

7. 清洗处理，重复步骤5。

8. 在每孔加入100μl底物显色液，在室温下避光反应10分钟。

9. 加入终止液50μl，混匀后在10分钟内于630nm测定各孔吸光值。

参考值

正常情况下，阴性对照的平均OD值应≥0.6，而阳性对照的平均OD值≤0.5。

检验结果的判定

若S为样品孔OD630nm值，N为阴性对照OD630nm平均值：

• 若S/N≤0.6，判定为阳性。
• 若0.6＜S/N≤0.7，判定为可疑。
• 若S/N＞0.7，判为阴性。

结果显示阳性可能表明该猪存在野毒感染或接受了非gE基因缺失疫苗免疫。

注意事项

1. 实验过程中需佩戴手套并穿工作衣，严格遵循消毒隔离制度，所有实验废弃物需按传染物处理。

2. 终止液具腐蚀性，避免接触皮肤及衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

3. 对于阴阳性对照、酶标记物如出现少量悬浮物，属正常现象。

4. 酶标板在冷藏环境中取出后需达到室温再开封，未用完的酶标板应放入干燥剂密封袋中保存。

5. 浓缩洗涤液需恢复至室温以防结晶，使用时需确保每孔液体充足以防游离酶未被完全洗净。

6. 用于检测的样品应保持新鲜。

7. 检测结果的判定应以酶标仪读数为准。

8. 不同批号的试剂组分不得混用。

选择俄罗斯专享会294的试剂盒，保障您的检测精准与可靠。